闻所未闻:WBC 为何会干扰 CRP 检测?

2017-02-15 15:45 来源:丁香园 作者:位冒冒
字体大小
- | +

许多蹊跷事,皆是偶得之。白细胞(WBC)与 C-反应蛋白(CRP)本来是两个风马牛不相及的检验项目,没想到 WBC 居然可以干扰 CRP 的检测!而且,为什么白血病计数异常增高疑似白血病,而 CRP 却处于正常范围内?这到底是怎么一回事情呢?

案例经过

同事值夜班时,接到儿科医生的咨询,说某患儿的血常规异常,想在本院进行复查;患儿,男,9 岁,因腹痛就诊,家长述无其他异常症状和体征。

遇到血常规异常的结果,都是以静脉 EDTA 抗凝全血复查为准。儿科医生开具了「血常规+CRP」的检验项目,诊断为「急性胃肠炎?」;同事使用全自动血细胞分析仪(可以做 CRP 检测)时,发现患儿的 WBC 值高达 353.36×109/L,然而,CRP 结果却是未做出。同事询问了患儿家长,家长想起一个月前患儿诉膝盖与手腕疼痛,当时未留意。

关于 CRP 做不出结果该如何处理,同事拿不定主意,向其他同事请教;最后,大家共同讨论,使用标本离心后的血浆进行检查,测出 CRP 的结果为 0.65 mg/L(参考值为 0~4 mg/L)。结果如下图所示。

屏幕快照 2017-02-14 下午3.30.32.png
屏幕快照 2017-02-14 下午3.31.35.png

案例分析

欲知其然,必先知其所以然。我们一步一步来还原一下解决此类问题的推理流程。

1. 首先,需要了解我们科全自动血细胞分析仪 CRP 检测的原理。使用胶乳免疫比浊法测定全血中的 CRP 浓度:即 LC 溶血剂与全血标本混合后,破坏血细胞,去除全血中细胞粒子对免疫比浊测试的干扰;CRP 乳胶试剂与上述溶血样本混合,乳胶试剂中抗体标记的乳胶微球与溶血样本中的 CRP 发生凝集反应,造成溶液的浊度增加;最后,通过比浊法分析得到 CRP 的浓度。

2. 与常见的 CRP 检测方法不同的是,全自动血细胞分析仪 CRP 检测使用的是全血标本,使用特殊溶血剂去除细胞粒子的干扰。这里需要注意的是,成熟红细胞包括细胞膜与血红蛋白成分,被溶解后产生的血红蛋白水溶液,其浊度基本可以被仪器方法学扣除;而成熟白细胞内含有细胞核等有形物质,即使细胞被溶血剂破坏以后,溶液中依然存在许多「微小粒子」,白细胞计数正常的情况下,对该比浊测定没有太大影响,但当遇到白细胞计数异常增高时,便出现了「CRP 不出结果」的现象。

3. 既然知道了白细胞计数异常增高时,溶血后溶液中的「微小粒子」也会异常增高且影响 CRP 的测定;那么,我们使用什么样的方法可以消除这种影响呢?直接想到的就是稀释法与离心法。

4. 稀释法与离心法,哪个更适合?首先,我们看一下稀释法,稀释法可以成比例降低白细胞计数,当达到仪器可以扣除干扰的浓度(这个界限没有明确值或进行测定)时,便可以检测出稀释后的 CRP 浓度;然而,这里有一个矛盾点,就是当原标本中 CRP 值本身就比较低时,再经过稀释以后,有可能因为浓度太低无法检出或放大误差造成结果不准确。

那么,离心法相对就简单直观了,直接离心去除标本中的白细胞,干扰因素去除的很干净,相当于直接使用血浆测定 CRP;而最后的结果也正如我们推论的一样,离心法在此种情况下显得更加行之有效。

临床小结

C-反应蛋白(CRP)是一种能与肺炎链球菌 C 多醣体反应的急性时相反应蛋白,由肝细胞合成,并广泛存在于血浆、胸腹水、心包液和关节液等标本类型中;作为一项极为灵敏的指标,血浆 CRP 浓度与急性心梗、创伤、感染、外科手术、炎症、肿瘤等均有密切联系,由此可见,其临床应用比较广泛。目前,临床实验室检测 CRP 的常规方法主要有胶乳凝集试验、免疫比浊法(散射比浊法、透射比浊法)、放射免疫测定法(RIA)、酶联免疫吸附试验和发光法。

为什么该患儿白细胞计数异常增高(疑似白血病),而 CRP 却处于正常范围内?即 WBC 与 CRP 结果为什么不一致?CRP 是感染的急性期反应物,不受性别、年龄、贫血、免疫力、化疗等因素的影响,并且在恶性肿瘤中也不会升高;当患者出现细菌感染时,方可见 CRP 升高。

近年来,许多研究指出,CRP 与 WBC 联合检测有助于儿童临床感染性疾病的早期诊断和鉴别诊断,而 CRP 对儿童细菌感染性疾病的早期诊断比 WBC 更为敏感。于是,带有 CRP 检测功能的全自动血细胞分析仪便应运而生,具有用样本量少、快速、简便等优点;然而,虽然随着仪器的更新换代和功能的提升,可以通过溶解细胞和计算算法优化等手段扣除部分干扰,但是,仪器的局限性依然存在。例如,文中所提及的 WBC 对 CRP 的干扰。

本文作者 | 位冒冒,河南省安阳市人民医院检验科

参考文献:

[1] 高原, 张泓, 郑岚, 等. C-反应蛋白在儿童白血病化疗前后的应用 [J]. 现代检验医学杂志, 2007, 22(5):128-128.

[2] 陈军民, 宋华, 杨世隆, 石淑文. 白血病儿 C-反应蛋白测定及其意义 [J]. 浙江预防医学,2002,14(8):66-66.

[3] 王文静, 郭丙申.C-反应蛋白与白细胞联合检测的临床应用 [J]. 医学理论与实践,2009,22(6):701-702.

[4] 周宓, 潘柏申.C-反应蛋白在临床应用中的进展 [J]. 国际检验医学杂志,2005,26(1).

[5] 郭平, 王剑飚, 陈骊婷, 等. 关于血细胞分析仪 CRP 一体机临床应用性能的研究 [J]. 检验医学与临床, 2016, 13(9):1216-1219.

[6] 方伟, 何艳群. 迈瑞 BC-5390 血液分析仪在测定 CRP 和血常规试验中的应用 [J]. 医学信息, 2015(40):377-378.

编辑: 张开平

版权声明

本网站所有注明“来源:丁香园”的文字、图片和音视频资料,版权均属于丁香园所有,非经授权,任何媒体、网站或个人不得转载,授权转载时须注明“来源:丁香园”。本网所有转载文章系出于传递更多信息之目的,且明确注明来源和作者,不希望被转载的媒体或个人可与我们联系,我们将立即进行删除处理。

网友评论